摘要：研究藕带中过氧化物酶（POD）的提取和纯化技术,以及温度、pH值和部分化学物质对POD酶活性的影响。结果表明：藕带中的过氧化物酶提取物经过40%饱和度的硫酸铵除杂、80%饱和度的硫酸铵沉淀、DEAE-52纤维素柱层析（100mL,0.1 mol/L NaCl的pH 7.2的磷酸缓冲溶液洗脱）、葡聚糖凝胶G-75柱层析（pH 7.2的磷酸缓冲溶液洗脱）进行分离纯化后,经SDS—PAGE鉴定为单一带,其分子量约为42kD,纯化倍数及蛋白质产率分别为32.68倍和2.11%。藕带中POD的最适温度为40℃,最适pH值为5.0。温度高于80℃基本失活,pH值小于2.0或大于8.0也基本失活。抗坏血酸对POD有明显的抑制作用;尿素、SDS、KSCN对POD具有轻微的抑制作用;草酸在低浓度时对POD具有激活作用,高于0.01 mol/L时有明显的抑制作用。

关键词：藕带 过氧化物酶 分离纯化 酶学性质 

单位：湖南农业大学食品科学技术学院 湖南长沙410128