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S.Heidelberg血清型特异性基因筛选及PCR检测方法的建立与应用

翟立公; 郭元新; 王俊颖; 王蓓蓓 食品与机械 2018年第06期

摘要:海德尔堡沙门氏菌(Salmonella enterica serovar Hei-delberg,SH)是沙门氏菌属内重要的致病性血清型.通过对SH基因组序列进行BLAST比对和PCR验证,筛选出了4个SH血清型特异性基因(SeHA_C2639、SeHA_C2640、SeHA_C3259和SeHA_C3258).以SeHA_C3258作为靶点设计引物pHAm8(350 bp)和沙门氏菌属特异性引物139-141(284 bp),建立SH的PCR检测方法,并对其应用效果进行评价.结果表明,经55株不同血清型的沙门氏菌和其他常见食源性致病菌证明,该检测体系具有较好的特异性,纯菌菌落灵敏度为6.1×10^2 CFU/mL.以浓度为N×10^5-N×10^1 CFU/mL的大肠杆菌或鼠伤寒沙门氏菌为干扰菌时,该体系对102 CFU/mL的SH检测结果无影响.人工污染SH的牛奶样品,经8 h培养,检测限达1.52 CFU/mL.该检测方法能快速、准确检测出食品中的SH,有利于在食品安全领域中的应用.

关键词:海德尔堡沙门氏菌血清型特异性基因聚合酶链式反应

单位:安徽科技学院; 安徽滁州233100

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