摘要:以4-氨基邻苯二甲酸为原料,通过酯化反应合成半抗原4-氨基邻苯二甲酸二丁酯,将合成的半抗原通过重氮化反应与钥孔血蓝蛋白(KLH)进行偶联制备免疫抗原,与牛血清白蛋白(BSA)进行偶联制备包被抗原。通过免疫新西兰大白兔获得邻苯二甲酸二丁酯抗血清,利用纯化获得的抗体和包被抗原建立邻苯二甲酸二丁酯间接竞争酶联免疫检测方法(ELISA)。该方法的IC50为40.68μg/L,最低检测限IC15为1.98μg/L,方法对邻苯二甲酸二丁酯具有较好的特异性。经对白酒、牛奶、食用油样品进行检测,添加回收率为84.57%~102.40%,用气相色谱-质谱法(GC-MS)进行验证,两种方法均呈现良好的线性相关性(R2=0.9908)。研究建立的方法可以被应用于食品中塑化剂邻苯二甲酸二丁酯的快速检测。
关键词:间接竞争elisa 邻苯二甲酸二丁酯 多克隆抗体 酶联免疫分析法 食品分析
单位:食品营养与安全国家重点实验室〔天津科技大学〕; 天津300457; 天津科技大学食品工程与生物技术学院; 天津300457
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