摘要：目的：预测和验证miR-30a-3p的靶基因。方法：利用生物信息学方法预测miR-30a-3p的靶基因;扩增靶基因3＇UTR区,与pmirGLO质粒连接构建靶基因融合表达载体后与miR-30a-3p mimics共同转染到人正常滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞中,利用双荧光素酶报告基因实验验证miR-30a-3p与靶基因的靶向关系;在HTR-8/SVneo细胞中转染miR-30a-3p mimics,利用Western Blot实验检测靶蛋白表达水平。结果：生物信息学方法预测结果显示胰岛素样生长因子-1（IGF-1）为miR-30a-3p靶基因之一;双荧光素酶报告基因实验显示,IGF-1基因3＇UTR区中含有明确的miR-30a-3p结合位点;Western Blot实验结果显示HTR-8/SVneo细胞转染miR-30a-3p mimics后,IGF-1蛋白表达水平明显下调（P〈0.05）。结论：miR-30a-3p与IGF-1有确切的靶向关系,miR-30a-3p能够负性调控IGF-1蛋白水平的表达。

关键词：微小rna 双荧光素酶报告基因实验 

单位：第四军医大学唐都医院; 陕西西安710038; 解放军第四五六医院; 山东济南250001; 解放军总医院; 北京100853