摘要：目的建立一种简便、快速、实用的检测阿德福韦（ADV）耐药相关性HBV变异（rtA181V／T／S和rtN236T变异）的方法。方法根据GenBank收录的HBV基因全序设计套式-PCR引物，使野毒株的PCR产物上游末端引入BglⅠ的酶切位点，使rt236变异株的PCR产物下游末端引入BseDI（SecI）的酶切位点，建立PCR限制性片段长度多态性（RFLP）方法。用此方法分别检测含rt181变异株、rt236变异株及野毒株质粒和3例ADV耐药慢性乙型肝炎患者血清标本。将变异株和野毒株配成不同比例，再用此方法检测，以了解该方法的敏感性。结果本研究建立的PCR-RFI。P方法可同时检测rt181变异和rt236变异；用此方法检测血清标本，结果与测序及克隆分析一致；此方法可检测出标本中10％的变异株。结论应用PCR-RFLP方法可同时检测rtA181WT／S和rtN236T变异，具有较高的敏感性，可用于ADV耐药变异的早期诊断。

关键词：乙型肝炎病毒 阿德福韦耐药 聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 

单位：复旦大学附属华山医院传染科; 华山医院肝病中心; 上海200040