摘要：目的制备铜绿假单胞菌（PA）的外膜蛋白（Opr）D2多克隆抗体，探讨OprD2缺失与亚胺培南耐药的关系。方法常规酚-氯仿法提取PA的基因组DNA，PCR扩增OprI）2基因，构建原核表达质粒pRSET-OprD2，在大肠埃希菌BL21（DE3）中表达目的蛋白，胶回收后制备兔多克隆抗体，应用该抗体检测临床分离的32株PA OprD2的表达情况。结果成功构建了OprD2原核表达载体，制备了特异性好的OprD2多克隆抗体。蛋白印迹法检测27株临床分离的耐亚胺培南PA，20株（74．1％）OprD2表达缺失，5株（18．5％）OprD2表达明显减少，2株（7．40／00）OprD2表达正常。结论临床分离的PA OprD2表达的缺失或减少是PA对亚胺培南耐药的主要机制之一。

关键词：铜绿假单胞菌 外膜蛋白 多克隆抗体 亚胺培南 耐药性 

单位：华中科技大学同济医学院附属协和医院传染科; 武汉430022