摘要：目的建立金葡菌氨基糖苷类抗生素耐药基因的多重PCR快速检测体系，了解耐药基因acc（6′）～Ⅰe＋aph（2″）、aph（3′）-Ⅲat ant（4′）-Ⅰa在广州地区的流行分布。方法采用VITEK-60或PHOENIX-100微生物自动鉴定系统鉴定菌株及药敏试验，利用琼脂扩散法检测4种氨基糖苷类抗生素的耐药表型。通过优化PCR体系建立多重PCR并应用于检测金葡菌氨基糖苷类抗生素耐药基因。结果构建了四重PCR快速检测体系，124株金葡菌临床分离株中，acc（6′）-Ⅰe＋aph（2″）、aph（3′）-Ⅲa和ant（4′）-Ⅰa的检出率分别为62．1％、32．3％和1．6％；所有庆大霉素、奈替米星以及阿米卡星耐药的金葡菌菌株均检测到上述3个耐药基因中的1个或1个以上基因；74株mecA阳性菌株中72株（97．3％）检测到acc（6′）-Ⅰe＋aph（2″）基因。结论所构建的多重PCR检测体系为临床实验室提供快速而有效的菌株耐药基因检测手段。编码AAC（6′）-APH（2″）双功能酶的acc（6′）-Ⅰe＋aph（^2″）基因是金葡菌最重要的氨基糖苷类抗生素耐药基因，其次为aph（3′）-Ⅲa，ant（4′）-Ⅰa则少见。

关键词：金葡菌 多重聚合酶链反应 氨基糖苷类抗生素耐药基因 

单位：广东省人民医院医学研究中心广东省医学科学院 广州510080 南方医科大学公共卫生与热带医学学院病原生物学系