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草莓植株中病毒dsRNA的分离和鉴定

李贺; 代红艳; 张志宏; 高秀岩; 杜国栋; 张馨宇 中国农业科学 2006年第01期

摘要:【目的】病毒核酸分离是病毒基因组解析的基础,本研究旨在建立草莓病毒的dsRNA分离方法,获得草莓主要病毒的部分基因组序列。【方法】采用改进的dsRNA分离方法,对草莓病毒指示植物和栽培品种中的病毒dsRNA进行分离,通过琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR来鉴定。【结果】不同草莓品种中病毒dsRNA的含量不同,试管苗叶片中dsRNA含量高于露地苗幼叶,而露地苗幼叶中dsRNA含量明显高于完全成熟叶。dsRNA对DNasc Ⅰ具有很强的耐性;当酶解缓冲液中含0.5mol·L^-1 NaCl时,dsRNA对RNascA具有较强的耐性。利用DNA凝胶回收试剂盒,能够有效回收凝胶中的dsRN段。应用RT-PCR技术,从凝胶回收的dsRNA及ONasc Ⅰ/RNasc A两酶酶解处理后的dsRNA中分别扩增出草莓斑驳病毒和草莓轻型黄边病毒的特异片段。【结论】建立了从草莓植株中分离和鉴定病毒dsRNA的完整技术体系,为草莓病毒中国分离物的基因组解析奠定了重要基础。

关键词:草莓dsrna病毒分离

单位:沈阳农业大学园艺学院; 沈阳110161

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中国农业科学

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