摘要:【目的】克隆新的植物MYB转录因子基因,进行序列分析,并对其功能进行初步鉴定。【方法】RT—PCR法结合RACE-PCR法分离克隆MYB基因cDNA全长序列;酵母系统检测其转录激活活性;半定量RT—PCR检测目的基因在植物体中的表达情况,及对类黄酮代谢途径中生物合成酶的影响。【结果】根据植物中MYB基因DNA结合域保守区设计简并5I物,以大豆品种中豆27的叶片为材料,RT—PCR扩增出两个MYB基因同源片段;据此设计基因特异引物,通过RACE-PCR分离克隆出两个新的MYB基因GmMYBZI.GmMYBZ2。酵母系统检测表明,GmMYBZ2具有转录激活功能,D-半乳糖苷酶活性为10.35u;半定量RT-PCR在中豆27的茎和叶中检测到GmMYBZI的表达,而GmMYBZ2在植物的根、茎、叶及未成熟种子中均有表达;对转基因烟草的RT-PCR检测结果显示,GmMYBZ2的表达可抑制类黄酮代谢途径中PAL、C4H,4CL、CHS.CHI、F4H及FLS等生物合成酶基因的表达。【结论】从大豆栽培品种中豆27中克隆出了两个新的MYB基因GmMYBZI、GmMYBZ2;功能研究表明,GmMYBZ2可能参与植物类黄酮合成调控。
关键词:大豆 myb转录因子 基因表达调控
单位:四川农业大学生命科学与理学院 四川雅安625014 中国农业科学院生物技术研究所 北京100081 四川农业大学玉米研究所 四川雅安625014 哈尔滨工业大学(威海)海洋学院 山东威海264209
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社
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