摘要：【目的】探讨氧化应激在镉诱导大鼠肝细胞凋亡中的作用。【方法】采用两步灌流法获得大鼠肝细胞,经过24 h培养,用醋酸镉处理细胞,或者Z-VAD-fmk、NAC和镉共同处理细胞。应用MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞内ROS水平和线粒体膜电位,分光光度法检测caspase-3活性、GSH和MDA含量。【结果】结果表明,肝细胞暴露于浓度为2.5、5、10μmol.L-1的镉后,细胞相对存活率显著下降（P〈0.01）,凋亡率显著或极显著升高（P〈0.05或P〈0.01）,呈剂量-效应关系;2.5和5μmol.L-1镉组在1.5 h之前导致细胞内ROS水平显著或极显著升高（P〈0.05或P〈0.01）;镉暴露可使肝细胞Δψm显著或极显著降低（P〈0.05或P〈0.01）;NAC能够显著减少镉引起的凋亡细胞数量和极显著降低凋亡率（P〈0.01）,可以显著降低单独镉暴露组ROS水平升高和阻止ΔΨm降低（P〈0.05）;细胞内GSH含量12 h时随镉剂量增高而降低,部分剂量组极显著低于对照组（P〈0.01）,24 h时随剂量增高而升高,部分剂量组显著或极显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）;细胞内MDA含量随着镉浓度的增大而升高,10μmol.L-1剂量组MDA的含量显著高于对照组（P〈0.05）;未见caspase-3活性升高,caspase抑制剂Z-VAD-fmk对镉致细胞凋亡无影响。【结论】醋酸镉致肝细胞凋亡与其引起ROS产生并导致氧化损伤的非caspase途径有关。

关键词：镉 大鼠肝细胞 细胞凋亡 氧化应激 

单位：扬州大学兽医学院 江苏扬州225009 河南科技大学动物科技学院 河南洛阳471003