摘要:【目的】克隆斜纹夜蛾受翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因,分析其序列特征,为深入研究该基因奠定基础。【方法】利用RACE末端快速扩增技术,在斜纹夜蛾卵巢细胞中克隆TCTP基因的全长。根据不同物种间TCTP基因的同源性来构建进化树,并在原核细胞中对斜纹夜蛾TCTP进行表达。【结果】克隆得到斜纹夜蛾TCTP基因全长cDNA,登录号为HQ896486.1。序列分析表明,该基因cDNA全长829bp,开放阅读框长519bp,编码含172个氨基酸的蛋白,蛋白分子质量19.67kD。生物信息学分析表明,斜纹夜蛾TCTP基因属于受翻译控制肿瘤蛋白家族,与其它物种TCTP基因有很高相似性。构建重组质粒pET32a(+)-TCTP,在大肠杆菌中表达重组蛋白,确定了1mmol·L^-1IPTG诱导4h为重组蛋白表达的最佳条件,在短期内能得到大量稳定性好的TCTP蛋白。【结论】从斜纹夜蛾卵巢细胞中克隆得到斜纹夜蛾TCTP基因全长cDNA,并且成功在原核细胞中进行表达。本研究为深入研究斜纹夜蛾TCTP的功能以及针对斜纹夜蛾TCTP基因RNAi干扰的生物防控提供了理论依据和技术支持。
关键词:斜纹夜蛾 tctp基因 克隆和表达 序列分析
单位:华南农业大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室/天然农药与化学生物学教育部重点实验室 广州510642
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社