摘要：【目的】采用家蚕丝腺生物反应器这一蛋白高效表达系统，尝试建立一种高效、低廉、稳定生产狂犬病病毒核蛋白（RVNP）的技术体系，为生产基因工程疫苗奠定基础。【方法】通过RT-PCR方法克隆获得RVNP序列，采用家蚕丝胶蛋白基因（Serl）启动子为特异性启动子，将刀卿构建到含有增强型绿色荧光蛋白（EGFP）筛选标记基因的piggyBac转座子表达载体（pBA3EGFP）中，并采用显微注射转基因家蚕技术构建家蚕丝腺生物反应器。【结果]G1代通过EGFP标记的筛选获得转基因家蚕阳性蛾区26个，蛾圈阳性率为59．09％。PCR实验证实月VIVP已经整合到家蚕基因组中，Western blot分析表明RVNP蛋白可能附着于丝胶蛋白并随家蚕吐丝行为分泌到蚕茧中。【结论】获得了能够表达外源的RVNP蛋白的转基因家蚕品系，该系统有望成为高效、低廉、稳定地生产狂犬病基因工程疫苗的技术体系之一。

关键词：狂犬病 丝腺生物反应器 piggybac 家蚕 

单位：浙江大学动物科学学院特种经济动物科学系 杭州310029 浙江大学农业部动物病毒学重点实验室 杭州310029 湖北省畜禽育种中心 武汉430070