摘要:【目的】克隆获得亚洲玉米螟(Ostrinia furncalis)蛋白酶激活受体类转录因子p和,(protease—activatedreceptor—domainproteinl)(ofpap1)cDNA序列(GenBank登录号:KC857457),明确其基因结构特征,并进一步研究该基因的表达特性及其在生长发育过程中的作用,为亚洲玉米螟的遗传控制提供潜在的靶标基因。[方法]采用RT—PCR和PCR技术,克隆Ofpdp』cDNA序列,利用相关软件进行生物信息学分析;利用qPCR(quantitativereal-timepolymerasechainreactiOil)研究卵期及幼虫期Ofp劫』表达特征;在原胚期利用RNA干扰技术(RNAi)研究其生物学功能。【结果】克隆得到基因OfpapJ,全长为960bp,开放阅读框804bp,编码267个氨基酸,同源比对发现OfPDPIC-末端与其它昆虫PARbZIP(basicleucineZipper)转录因子非常相似,含有3个高度保守的结构域,系统发育分析的分类结果与生物学上物种分类相吻合。qPCR结果显示Ofpap,的mRNA表达量在卵发育76h左右存在显著的表达高峰。在亚洲玉米螟原胚期,注射ofpap1的双链RNA(dsRNA)48h后,ofpap1mRNA表达量被沉默了71%。【结论】成功地从亚洲玉米螟中克隆得到ofpap,ofpap1进化非常保守,属于PAl/bZIP亚家族;ofpap1可能在幼虫定型时期胚胎生理结构的变化过程中起到重要作用。
关键词:亚洲玉米螟 ofpdpl 基因克隆 系统发育分析 mrna表达
单位:东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室 哈尔滨150040 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所昆虫科学研究中心/中国科学院昆虫发育与进化生物学重点实验室 上海200032
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