摘要：【目的】MicroRNA（miRNA）是一类长度为20—22个核苷酸（nt）且高度保守的非编码小RNA。迄今为止，在病毒、动物、植物中都有发现，如在Mareks病毒、果蝇、斑马鱼、人类以及拟南芥等多种生物中都有存在。其通过与靶基因特异性的碱基互补配对使靶基因降解或者受到抑制，在转录后水平调控靶基因的表达水平。miRNAs参与多种生物的细胞增殖、分化、代谢与死亡等多种生物学过程。为了解microRNA-10在亚洲璃眼蜱中的潜在生物学功能，试验获得亚洲璃眼蜱miR-10的前体、成熟体序列；分析亚洲璃眼蜱不同发育阶段及组织miR-10的表达水平，及亚洲璃眼蜱miR-10的生物学意义；为进一步研究miR-10与亚洲璃眼蜱生长发育间的关系奠定基础。【方法】用TrizolReagent分别提取不同发育阶段及组织的总RNA，用SYBR Prime Script。MmiRNART—PCRKit（TaKaRa Code：RR716）制备eDNA。参考miRBase数据库中isc-miR-10（登录号：M10012262）序列，设计特异性5l物，通过PCR的方法从亚洲璃眼蜱中扩增获得miR-10前体序列，通过MEGA4软件将此前体序列与已知物种的miR-10前体序列进行比对分析；利用qPCR技术分析亚洲璃眼蜱不同发育阶段及组织miR-10的表达情况；推测miR-10在亚洲璃眼蜱中的生物学功能。【结果】获得亚洲璃眼蜱miR-10的前体序歹IcuAcAucuAcccuGuAGAuccGAAuuuGuuuGccAcuAGAcuAcAAAuucGGuucuAGAGAGGcuuuGuGuGG，大小为73bp；亚洲璃眼蜱的miR-10前体序列与肩突硬蜱的相似性最高，是95．9％，且与其他节肢动物相似性在88．9％--91．7％之间；miR-10在不同物种问高度保守。miR-10的成熟体序列为UACCCUGUAGAUCCGAAUUUGU，种子序列为ACCC06U。在亚洲璃眼蜱的不同发育阶段中，饥饿若蜱的miR-10的表达水平最高，是卵的48．3倍；饥饿成蜱是卵的7．78倍；饥饿幼蜱是卵的2．78倍。在饥饿雌性成蜱吸血过程中，吸血3d的成蜱是饥饿成

关键词：亚洲璃眼蜱 克隆 表达分析 qpcr 

单位：中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室/甘肃省动物寄生虫病重点实验室 兰州730046 云南农业大学动物科学技术学院 昆明650201