摘要：【目的】花青素苷是月季花瓣呈红色或粉色的重要因素。R2R3-MYB蛋白是调控植物花青素苷合成的关键转录因子。从月季花瓣中克隆花青素苷调控相关的R2R3-MYB蛋白同源基因,并分析这些基因与月季花瓣颜色和花青素苷合成的关系,为花色基因工程改良奠定基础。【方法】根据植物花青素苷调控相关R2R3-MYB蛋白的保守序列设计简并引物,结合3＇-RACE和Y-RACE方法从月季花瓣中扩增同源基因的全长编码序列。用植物第四（Sg4）和第六（Sg6）亚家族的R2R3-MYB蛋白、拟南芥次生代谢调控相关的R2R3-MYB序列和克隆基因的编码蛋白进行多序列比较和进化分析。通过比较不同颜色的月季花瓣中花青素苷含量和R2R3-MYB蛋白基因的表达水平,分析月季花瓣中R2R3-MYB蛋白基因与花青素苷调控的关系。【结果】从月季‘红胜利’的红色花瓣中克隆了2个R2R3-MYB蛋白基因（RhMYBs4-1和RhMYBs6-1,GenBank登录号分别为KJ664810和KJ664811）。序列分析表明,RhMYBs4-1和RhMYBs6-1蛋白均含有保守的R2R3-MYB结构域,分别与植物Sg4和Sg6 R2R3-MYB蛋白同源。RhMYBs4-1具有Sg4 MYB蛋白典型的C1、C2抑制子和锌指结构。RhMYBs6-1具有Sg6 MYB蛋白特有的（A/S/G）NDV和KPRPR（T/S）基序。表达分析显示RhMYBs4-1和RhMYBs6-1均在月季‘红胜利’的花瓣中高水平表达,在叶片和花药中表达水平很低。比较7种不同颜色月季花瓣中的花青素苷含量和RhMYBs4-1和RhMYBs6-1的表达水平,发现红色花瓣中花青素苷含量远高于其他材料,相应地,RhMYBs4-1和RhMYBs6-1均在红色花瓣中具有最高的表达水平。在粉红色月季花瓣中,花青素苷含量不到红色花瓣的10%,RhMYBs4-1的表达水平极低,而RhMYBs6-1的表达水平与红色花瓣相当。【结论】月季RhMYBs4-1和RhMYBs6-1分别编码Sg4和Sg6亚家族的R2R3-MYB蛋白,均在红色月季花瓣中高水平表达,可能是月季花青素苷合成和花瓣颜色的重要调

关键词：月季 花瓣颜色 花青素苷 基因表达 

单位：西南大学生物技术中心/重庆市转基因植物与安全控制实验室 重庆400716