摘要：以水稻叶片、根和种子为材料,采用高通量快速法提取基因组DNA,用稻瘟病Pita基因分子标记进行检测,获得与预期片段大小一致的特异性条带,对165份育种材料的检测结果与稻瘟病接种鉴定一致。操作方法如下：将少量水稻叶片、根或种子放入200μL PCR盘中,加入70μL缓冲液A（含NaOH和Tween20）,在PCR仪中加热到95℃,保持10min,再加入70μL缓冲液B（Tris-HCl和EDTA）,该提取液可以直接用于PCR扩增。该方法具有几个优点：1）成本低,仅用4种化学试剂,共140μL提取液;2）操作简便,仅需3步,每人每天可以提取上千份样品;3）仪器设备简单,只用常规的PCR仪;4）可直接提取干种子的DNA;5）DNA质量好,能检测出水稻中的抗稻瘟病单基因Pita,并且与稻瘟病接种鉴定结果一致;6）用量少,只需要5～20mg叶片、20mg根或半粒籽粒。尤其是检测大量样本的基因型时,此种方法更显得高效便捷。

关键词：水稻 dna提取 分子标记 pcr 抗稻瘟病基因pita 

单位：云南省农业科学院粮食作物研究所 云南昆明650205 美国农业部农业研究局 国家水稻研究中心 美国斯图加特 AR72160 阿肯色州立大学 水稻研究与推广中心 美国斯图加特 AR72160