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大鼠胎脑皮质神经干细胞体外培养及诱导分化的实验研究

刘永海; 赵莲花; 赵辉; 沈霞; 张尊胜 中国实用神经疾病 2006年第06期

摘要:目的 从孕龄15d SD胚胎鼠脑皮质中分离并培养神经干细胞(neural stem cells。NSCs),观察其生长、增殖及分化。方法 采用包含碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮细胞生长因子(EGF)的无血清培养及单细胞克隆技术,对胚胎鼠脑皮质神经干细胞进行原代、传代培养及诱导其分化。用Nestin染色鉴定神经干细胞特性,用免疫组化方法(β-Ⅲ-tubulin、GFAP染色)检测神经干细胞分化为神经元及神经胶质细胞状况。结果 从孕龄15dSD胚胎鼠脑皮质中分离的组织,经原代及传代培养均可形成细胞克隆.切具有增殖能力。原代及传代培养细胞呈Nestin(神经上皮干细胞蛋白)表达阳性.诱导分化后的细胞表达神经元细胞、星形胶质细胞的特异性抗原。结论 本实验分离、培养的孕龄15dSD胚胎鼠脑皮质细胞Nestin表达阳性.分化后表达神经元和星形胶质细胞的标记物,是大鼠的神经干细胞,并具有多向分化潜能。

关键词:神经干细胞细胞培养分化大鼠

单位:徐州医学院附属医院神经内科; 徐州221002; 江苏徐州市中心医院神经内科; 徐州221002

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中国实用神经疾病

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