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PTEN基因逆转卵巢上皮性癌细胞耐药的机制研究

吴卉娟; 吴海涛; 翁丹卉; 邢辉; 卢运萍; 马丁 中华妇产科 2007年第09期

摘要:目的通过检测PTEN基因在卵巢上皮性癌(卵巢癌)顺铂敏感细胞株0V2008及0V2008配对的顺铂耐药细胞株C13K中的表达,探讨转染PTEN基因能否逆转C13K细胞对顺铂的耐药及其相关机制。方法半定量RT-PCR技术和蛋白印迹法检测0V2008和C13K细胞中PTENmRNA和蛋白的表达。将野生型PTEN基因真核表达质粒在脂质体介导下转染C13K细胞,同时以转染空载体和未转染的C13K细胞作为对照,分别应用RT-PCR技术检测各组细胞PTENmRNA表达的变化,应用蛋白印迹法检测各组细胞PTEN、蛋白激酶B(AKT)及磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达的变化;四甲基偶氮唑蓝(M1Tr)比色法观察转染PTEN基因后C13K细胞对顺铂敏感性的变化,流式细胞仪分析顺铂作用后的细胞凋亡情况。结果(1)PTENmRNA在0V2008和C13K细胞中的表达水平分别为1.02±0.05和0.45±0.03,而0V2008、C13K细胞中PTEN蛋白的表达水平分别为1.02±0.07、0.55±0.03,两种细胞PTENmRNA和蛋白的表达水平分别比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。(2)PTEN基因转染48h后,C13K细胞中PTENmRNA、蛋白的表达水平分别为2.04±0.10和0.94±0.04,分别与转染空载体和未转染的C13K细胞比较,差异均有统计学意义(P〈0.01);p-AKT蛋白的表达水平(0.94±0.07)较转染空载体(1.66±0.10)和未转染(1.68±0.14)的C13K细胞显著降低(P〈0.05)。(3)转染PTEN基因的C13K细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50)为(7.2±0.3)μmol/L,明显高于转染空载体和未转染的C13K细胞[分别为(12.7±0.4)、(13.0±0.3)μmol/L,P〈0,05]。(4)顺铂作用24h后,转染PTEN基因、转染空载体和未转染的C13K细胞的凋亡率分别为(41.7±0.9)%、(18.6±0.7)%和(15,3±0.8)%,前者明显高于后两者(P〈0.01)。结论PTEN基因在0V2008细胞中的表达明显高于C13K细胞。转染野生型P

关键词:卵巢肿瘤pten磷酸水解酶类顺铂抗药性肿瘤

单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科; 武汉430030; 湖北省石首市人民医院泌尿外科

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