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survivin基因修饰后对卵巢上皮性癌HO-8910细胞周期及化疗敏感性的影响

彭立平 黄建鸣 张国楠 查晓 任源 樊英 邓碧芳 中华妇产科 2010年第11期

摘要:目的 探讨survivin基因经不同方式基因修饰后对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞系HO-8910细胞周期和化疗敏感性的影响.方法 对survivin基因进行两种方式的基因修饰,即survivin基因核苷酸序列第34位苏氨酸突变为丙氨酸(T34A)和N末端缺失8个氨基酸(N-8AA),构建含survivin^N-8AA和survivin^T34A基因的表达载体,将含survivin^N-8AA、survivin^T34A和野生型survivin基因的表达载体转染HO-8910细胞(分别为SN-HO-8910组、M-HO-8910组和Sur-HO-8910组),以转染空载体pcDNA3.1质粒(PC-HO-8910组)为对照.(1)采用逆转录(RT)PCR技术检测和测序法鉴定转染后HO-8910细胞各目的 基因mRNA的表达;(2)采用流式细胞仪检测各组转染后HO-8910细胞的细胞周期比例;(3)采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组转染后HO-8910细胞对顺铂、紫杉醇和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂--LY294002的敏感性[以50%抑制浓度(IC50)表示].结果 (1)RT-PCR技术检测和测序法鉴定结果显示,转染后的HO-8910细胞分别稳定表达survivin^T34A、survivin^N-8AA和野生型survivin mRNA.(2)SN-HO-8910组细胞G0/G1期比例为44.72%,明显低于PC-HO-8910组的49.64%(P<0.05);而G2/M期和S期比例(分别为1.06%和54.22%)明显高于PC-HO-8910组(分别为0.56%和49.80%;P<0.05).M-HO-8910组细胞G2/M期和S期比例分别为0.16%和36.33%,明显低于PC-HO-8910组(P<0.05);而G0/G1期比例(63.51%)明显高于PC-HO-8910组(P<0.05).Sur-HO-8910组G0/G1期、G2/M期和S期比例分别为54.46%、0.62%、44.92%,分别与PC-HO-8910组比较,差异均无统计学意义(P>0.05).(3)Sur-HO-8910组细胞对顺铂和紫杉醇的IC50[分别为(20.4±6.1)和(36.7±4.0)μmol/L]均明显高于PC-HO-8910组[分别为(14.4±3.9)和(28.6±3.6)μmol/L;P<0.05].SN-HO-8910组细胞对顺铂和LY294002的IC50[分别为(7.6±1.0)和(13.2±4.0)μmol/L]均明显低于PC-HO-8910组[分别为(14.4±

关键词:微管相关蛋白质类卵巢肿瘤细胞系肿瘤细胞周期

单位:四川省肿瘤医院妇瘤科 成都610041 四川省肿瘤医院基础研究部 成都610041

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