摘要:目的 探讨氧化应激状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ型细胞)修复存活、凋亡及其细胞外信号调节激酶(ERK)对凋亡的调控作用。方法 采用过氧化氢(H2O2)处理体外分离纯化培养的原代大鼠ATⅡ型细胞;用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测H2O2刺激后ATⅡ型细胞磷酸化ERK1/2(p—ERK1/2)的表达,用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测细胞存活率;用流式细胞仪检测细胞凋亡率,并观察ERK特异性抑制剂PD98059干预后细胞凋亡的变化。结果 与对照组比较,10μmol/L和100μmol/L的H2O2处理对ATⅡ型细胞存活率和凋亡率无明显影响;500μmol/L和1000μmol/L的H2O2处理可导致ATⅡ型细胞的存活率明显降低,凋亡率显著升高(P均<0.05),呈剂量依赖性。500μmol/LH2O2处理ATⅡ型细胞30min,细胞存活率和凋亡率均无显著变化;处理180min细胞存活率明显降低,凋亡率明显增高(P均<0.05),呈时间依赖性。500μmol/LH2O2可刺激P—ERK1/2阳性表达,以刺激30min表达最强;使用ERK抑制剂(PD98059)干预后,ATⅡ型细胞凋亡率明显增高。结论 H2O2可以剂量和时间依赖的方式诱导ATⅡ型细胞凋亡,ERK信号转导途径参与了ATⅡ型细胞的凋亡调控,对氧化应激状态下的ATⅡ型细胞可能起到保护作用。
关键词:细胞凋亡 细胞外信号调节激酶 活性氧
单位:重庆医科大学附属儿童医院ICU; 400014
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