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p38丝裂原活化蛋白激酶基因敲除对小鼠胚胎成纤维细胞增殖的影响

龚小卫 魏洁 李煜生 程蔚蔚 邓鹏 姜勇 中华危重病急救医学 2008年第09期

摘要:目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因敲除对小鼠胚胎成纤维细胞增殖的影响。方法用蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测小鼠胚胎成纤维细胞中p38制^+/+和p380^-/-的表达;利用噻唑蓝(MTT)比色法绘制p38^+/+和p38^-/-细胞的生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期各时相所占百分比。结果绘制的生长曲线表明,p38^-/-细胞的生长速率明显下降,增殖受到抑制,细胞倍增时间延长,培养96h时,p380^-/-细胞数量较p38^+/+减少了15.5%,说明p38基因敲除明显抑制了G2/M的进程。流式细胞仪检测结果显示,p3^+/+。细胞中G0/G1期细胞占34.47%,G2/M期占10.81%,S期占54.72%;p380^-/-细胞中G0/G1期占48.49%,G2/M期占4.06%,S期占47.44%。与p38^+/+细胞相比,G1期的p380^-/-细胞增加了40.7%,S期则减少了13.3%,说明p38基因敲除抑制了G1/S的进程。结论p38基因敲除能够阻滞细胞周期进展,减慢细胞增殖速度。

关键词:p38丝裂原活化蛋白激酶基因敲除细胞增殖

单位:南方医科大学病理生理学教研室 广东省蛋白质组学重点实验室 广东广州510515

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