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C5a对内皮细胞表达血栓调节蛋白的影响

房巍 郭振辉 张保全 吴晓凤 李平 吕凤林 苏磊 中华危重病急救医学 2009年第03期

摘要:目的探讨补体C5a对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血栓调节蛋白(TM)表达的影响。方法体外培养HUVECs,以终浓度200μg/L重组人C5a刺激HUVECs8、12、16、20h以及以终浓度100、200、300μg/L的C5a刺激HUVECs 12h,采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)、蛋白质免疫印迹法(Western blotting)分别检测TM的mRNA及蛋白表达变化;观察C5a对其表达TM的时-效和量-效关系。结果C5a抑制了HUVECs在TM的mRNA和细胞膜表面蛋白水平表达。同时,C5a对TM表达的抑制作用存在时一效关系[8、12、16、20h时蛋白为(93.11±1.57)×10^-2、(71.05±3.39)×10^-2、(65.48±4.28)×10^-2、(62.69±4.03)×10^-2,mRNA为(301.71±80.40)×10^-6(38.29±20.24)×10^-6、(8.82±2.66)×10^-6、(7.05±0.80)×10^-6],且均于12h后降低程度明显减缓(P均〈0.05);并存在量-效关系(C5a100、200、300mg/L时蛋白为(113.25±3.97)×10、(80.18±2.56)×10、(73.22±4.36)X10,mRNA为(401.77±20.46)×10、(31.12±3.51)×10^-6、(18.19±1.46)×10^-6],TM蛋白在C5a300μg/L、mRNA在C5a200μg/L时刺激12h降低程度明显减缓(P均〈0.05)。结论C5a通过抑制TM的结构基因表达,进而减弱TM的蛋白翻译,从而参与了脓毒症时凝血亢进、炎症损害的病理生理过程。

关键词:c5a内皮细胞血栓调节蛋白

单位:广州医学院 广东 510010 广州军区广州总医院急危重病中心 广东 510010 第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所一室 重庆400042

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