摘要：目的探讨肌球蛋白轻链激酶（MLCK）抑制剂ML-7对细菌脂多糖（LPS）诱导的人肺动脉内皮细胞（HPAEC）和急性肺损伤（ALI）的影响。方法体外培养HPAEC，待4～6代予ML-7（10μmol／L）孵育60min后，再给予LPS刺激60min，四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测HPAEC活性；荧光显微镜下观察磷酸化肌球蛋白轻链激酶（p-MLCK）免疫反应细胞。20只雌性BALB／c小鼠随机分组，LPS组鼻内注入LPS（1μg／g）；ML-7组在LPS滴鼻前进行ML-7干预。观察小鼠肺湿／干重（W／D）比值、支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白含量、肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性和病理学改变；用免疫组化法检测肺组织MLCK和CD11b阳性免疫反应细胞，逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肺组织MLCK mRNA表达，蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测肺组织MLCK蛋白表达。结果与LPS组比较，HPAEC在ML-7孵育下吸光度（A）值增加（P〈0．01），P-MLCK免疫反应细胞明显减少（P〈0．05），肺W／D比值、肺组织MPO活性、BALF蛋白含量均明显降低（P〈0．05或P〈0．01）。病理结果显示，LPS组小鼠肺部炎症反应明显，以中性粒细胞浸润为主，肺泡充血、水肿；ML-7组肺部炎症及充血明显改善。免疫组化显示位于内皮的MLCK免疫反应细胞和位于炎性细胞的CD11b在ML-7组均较LPS组明显减少。ML-7组肺组织MLCK的mRNA和蛋白表达均较LPS组降低（P均〈0．05）。结论MLCK特异性抑制剂ML-7能提高LPS诱导的HPAEC生长活性，降低p-MLCK表达；减轻LPS诱导的中性粒细胞在肺内浸润、肺水肿及MLCK、CD11b蛋白和MLCK mRNA的表达。表明抑制MLCK活性可能通过减弱MLCK磷酸化而达到稳定血管屏障功能，防治ALI的作用。

关键词：肌球蛋白轻链激酶抑制剂 肌球蛋白轻链激酶 急性肺损伤 

单位：同济大学附属东方医院急危重病科 上海200120 上海交通大学附属瑞金医院呼吸科