摘要：目的建立两步培养法分离培养人孕中期羊水间充质干细胞（Mscs）的方法，观察羊水MSCs向神经元样细胞的诱导分化。方法采用改进的两步培养法分离和培养人羊水MSCs，以p巯基乙醇诱导其向神经元样细胞方向分化；并使用流式细胞术、逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫细胞化学法研究人羊水MSCs的生物学特性。结果成功分离、培养和传代出人羊水MSCs。流式细胞术检测人羊水MSCs表达CD44、CD29、CD105，不表达CD45、CD34、人白细胞DR抗原（HLA—DR）；免疫荧光法和RT—PCR检测表明，部分人羊水MSCs表达转录因子Oct一4。两步培养法羊水MSCs集落形成率[（15．0±2．3）％]和Oct一4阳性细胞率[（1．2±0．3）％]均高于一步法[分别为（10．0±1．8）％，（0．9±0．2）％，P均〈0．053。羊水MSCs经p巯基乙醇诱导后细胞形态发生改变，伸出突起并呈神经球样改变；免疫细胞化学法检测显示（54．76±3．65）％的细胞表达神经元特异性烯醇化酶（NSE），同时（36．28±4．27）％的细胞表达神经胶质酸性蛋白（GFAP）。结论人羊水中存在MSCs，两步培养法是一种高效、简便、实用而且不干扰常规产前诊断程序的方法。在体外条件下，利用β-巯基乙醇和适宜的培养液可使羊水MSCs定向分化为神经元。

关键词：羊水细胞 间充质干细胞 转录因子oct一4 神经元 

单位：新疆医科大学第一附属医院博士后科研流动站 新疆乌鲁木齐市友谊医院肾内科 830000 新疆医科大学第一附属医院妇产科 830000 新疆医科大学第一附属医院肝胆外科 830000 新疆医科大学第一附属医院医学研究中心干细胞研究所 830000