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脓毒症大鼠脾脏淋巴细胞凋亡的实验研究

张畔 郭聪芳 骆宁 王兵 徐新女 中华危重病急救医学 2009年第12期

摘要:目的观察脓毒症大鼠脾脏T、B淋巴细胞的数量变化及细胞凋亡情况,探讨脓毒症时免疫失衡的机制。方法健康雄性Wistar大鼠80只,按随机数字表法分为假手术组(30只)、模型组(50只)。采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型,于制模后6、12、24、48、96h活杀动物取脾脏,行苏木素一伊红(HE)染色,光镜下观察脾脏组织病理变化;采用免疫组化法检测脾脏CD4+、CD8+T淋巴细胞和B淋巴细胞以及Bax、Bcl一2蛋白表达;采用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测脾脏细胞凋亡指数。结果光镜下观察模型大鼠脾脏白髓逐渐萎缩,淋巴小结结构破坏。制模6、12、24、48、96h,模型组大鼠脾脏CD4+T淋巴细胞数、B淋巴细胞数、Bcl一2蛋白表达均较假手术组明显降低(P均〈0.01),CD8+T淋巴细胞数与假手术组比较差异无统计学意义(P均〉0.05),细胞凋亡指数及Bax蛋白表达均较假手术组显著增加(P均〈0.01)。相关分析表明:Bcl一2蛋白表达与细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.659,P〈0.01),而Bax蛋白表达与细胞凋亡指数呈正相关p=0.522,P〈0.01)。结论脓毒症早期免疫功能处于紊乱状态,表现为脾脏CD4+T淋巴细胞数、B淋巴细胞数减少,细胞凋亡显著增加;Bax、Bcl一2在脓毒症脾细胞凋亡中发挥了关键作用。

关键词:脓毒症淋巴细胞凋亡

单位:天津市第一中心医院急救医学研究所 300192

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