摘要：目的 通过改变胞浆型磷脂酶A2（cPLA2）的活性,检测细菌脂多糖（LPS）及Ca2＋载体A23187诱导的人脐静脉内皮细胞株（ECV-304）上清液中瘦素（Leptin）水平的变化,探讨在体外炎症状态下cPLA2活性与细胞分泌Leptin的关系.方法 体外培养ECV-304细胞.实验1：将细胞分为空白对照组,LPS 3个浓度5、10、20 μg/ml刺激组,Ca2＋载体A23187 3个浓度0.1、 1.0、10.0 μmol/L刺激组共7个组,分别作用6、12、24 h后收集上清液.实验2：根据实验1结果将细胞分为空白对照组,LPS 20 μg/ml刺激组,cPLA2特异性抑制剂AACOCF3 3个浓度0.1、1.0、10.0 μmol/L与LPS合用刺激组,丝裂素活化蛋白激酶上游激酶1/2（MEK1/2）抑制剂 U0126 3个浓度0.1、1.0、5.0 μmol/L与LPS合用刺激组共8个组,在LPS刺激前1 h加入AACOCF3或U0126,LPS刺激24 h后收集上清液.采用放射免疫分析法检测Leptin水平.结果 实验1：随LPS刺激浓度增加和时间延长,细胞释放Leptin浓度逐渐减少,LPS 20 μg/ml组作用24 h后Leptin浓度（ng/ml）较空白对照组显著下降（0.540±0.109比0.823±0.048,P〈0.05）.但A23187对细胞分泌Leptin并无显著影响.实验2：LPS刺激能使细胞分泌Leptin浓度（ng/ml）明显下降（0.558±0.069比0.825±0.067,P〈0.05）;而用不同浓度AACOCF3或U0126干预后,细胞分泌Leptin的浓度（ng/ml）有所回升,且呈浓度依赖性（AACOCF3 0.1、1.0、10.0 μmol/L组分别为0.673±0.135、 0.723±0.055、 0.797±0.062;U0126 0.1、 1.0、5.0 μmol/L组分别为0.698±0.112、 0.862±0.184、0.935±0.145）,AACOCF3 1.0 μmol/L、10.0 μmol/L组和U0126 1.0 μmol/L、5.0 μmol/L组Leptin浓度均显著高于LPS 20 μg/ml刺激组（均P〈0.05）.结论 在由LPS诱导的体外炎症状态下,Leptin的分泌与cPLA2的活性具有一定的关系.

关键词：瘦素 胞浆型磷脂酶a 脂多糖 人脐静脉内皮细胞 

单位：解放军总医院呼吸内科 北京100853 解放军总医院基础所生化研究室