摘要:目的 初步探讨在急性腹腔感染早期肠上皮细胞NOD样受体(NLRs)的表达规律及其对肠屏障的作用.方法 将SD大鼠按随机数字表法分为对照组(n=6)和实验组(n=24),采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备急性腹腔感染模型.于术后2、6、12和24 h各取6只大鼠,采用实时荧光半定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测末端回肠黏膜上NOD2、NOD样受体3(NLRP3)的mRNA表达;蛋白质免疫印迹试验检测天冬氨酸特异性 半胱氨酸蛋白酶1(caspase-1)及紧密连接蛋白的表达;凝胶电泳迁移率(EMSA)实验检测核转录因子-κB(NF-κB)活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;原位末端缺刻标记试验(TUNEL)观察肠上皮细胞死亡情况,并用异硫氰酸荧光素(FITC)标记的葡聚糖溶液检测肠道的通透性.结果 NOD2mRNA表达在术后2h迅速升高达峰值,且明显高于对照组(75.50±13.03比1.00±0.00,P<0.01),术后6h迅速回落,此后缓慢下降;NLRP3 mRNA表达于术后2h降低,随后逐渐升高至12h达峰值,且明显高于对照组(4.03±0.71比1.00±0.00,P<0.05);caspase-1蛋白表达在术后2h即明显高于对照组(3.56±0.14比2.10±0.11,P<0.01),然后呈逐渐增高的趋势;紧密连接蛋白Occludin、ZO-1和Claudin-4的表达分别在术后2~6h即明显低于对照组(2 h Occludin:7.24±1.13比12.72±1.34,6 h ZO-1:0.47±0.09比1.57±0.17,2 h Claudin-4:1.63±0.28比3.40±0.34,P<0.05或P<0.01),随后均逐渐下降;NF-κB活性在术后2h即明显高于对照组(24.85±0.57比12.42±0.73,P<0.01),随后在一个高表达状态下呈缓慢下降趋势;IL-6在术后6h急剧增高达峰值(与对照组比较3088.07±330.03比26.19±7.58,P<0.01),随后缓慢回落;TNF-α于术后2h即明显高于对照组(110.75±19.18比7.86±3.58,P<0.01),最后呈逐渐增高的趋势;随着CLP后时间的延续,肠上皮
关键词:nod样受体 急性腹腔感染 肠屏障 信号通路
单位:天津医院普外科 300050 天津市人民医院普外科、天津市大肠肛门病研究所 300121
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