摘要：目的探讨高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖和迁移能力的影响。方法通过稳定转染的方法将pRNA—u6．1／Neo-对照和pRNA—u6．1／Neo—HMGB1短发夹RNA（shRNA）质粒转至HUVEC细胞，构建对照及HMGB1 shRNA细胞株，通过蛋白质免疫印迹试验（Western blotting）和实时荧光逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）进行稳定转染细胞的鉴定，通过四甲基偶氮唑盐（MTT）检测细胞株增殖情况，流式细胞仪检测细胞株周期的分布，划痕实验检测细胞株迁移能力。结果Western blotting及RT—PCR检测证明HMGB1 shRNA稳定转染的HUVEC细胞株构建成功，培养72h时细胞中HMGB1蛋白及mRNA表达较对照细胞明显降低（蛋白：0．436±0．027比1．017±0．038，T=12．180，P=0．000；mRNA：0．436±0．031比1．020±0．051，T=9．660，P=0．001）。MTF结果显示，HMGB1 shRNA稳定转染HUVEC细胞株2、3、4、5d的增殖能力比对照细胞株明显下降（2d：0．210±0．023比0．240±0．011，T=1．050，P=0．351；3d：0．240±0．022比0.361±0．030，T=3．203，P=0．033；4d：0．373±0．031比0．531±0．033，T=3．530，P=0．022；5d：0．441±0．031比0．602±0．030，T=4．180，P=0．106）。流式细胞仪检测结果显示，HMGB1 shRNA细胞株在s期的比例明显低于对照细胞株[（13．10±1．10）％比（21．12±1．20）％，T=4．950，P=0．001]。划痕实验结果显示，HMGB1 shRNA细胞株在细胞刮除后12h划痕愈合的细胞比例较对照细胞株明显降低[（21．07±3．33）％比（88．53±3．15）％，T=14．142，P=0．000]。结论HMGB1 shRNA能明显抑制HUVEC细胞的增殖和迁移能力。

关键词：人脐静脉内皮细胞 高迁移率族蛋白b1 增殖 迁移 

单位：中国医科大学附属第一医院重症医学科 辽宁沈阳110001