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血红素加氧酶-1对过氧化氢损伤的Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的影响

刘海霞 陈淼 杨秀娟 戢慧 陈涛 陈华军 中华危重病急救医学 2014年第02期

摘要:目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对过氧化氢(H202)刺激后原代培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)凋亡率、活化天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(easpase-3)及细胞色素C(Cyt-c)表达的影响。方法原代培养雄性sD大鼠AEC1I细胞,被随机分为4组:对照组(A组)加入生理盐水;H202损伤组(B组)加入0.5mmo]]LH,0:处理;HO一1预处理组(C组)给予0.2μmol/LHO-1预处理2h后加入0.5mmol/LH202;HO-1抑制组(D组)给予10μmol/L锌原卟啉Ⅸ(ZnppIX)预处理2h后加入0.5mmol/L H202,各组细胞处理后继续培养。于药物干预后2、6、12h采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用蛋白质免疫印迹试验(WesternBlot)检测活化easpase-3、Cyt-c蛋白表达。结果各组细胞凋亡率均随H202作用时间延长而逐渐升高;B组干预后各时间点AEClI凋亡率均较A组显著增加;C组AEClI凋亡率则较B组明显降低[2h:(11.46±1.47)%比(20.83±1.55)%,6h:(12.30±1.37)%比(27.14±1.53)%,12h:(12.62±1.39)%比(35.66±0.74)%,均P〈0.05];D组2、6、12hAEC1I凋亡率[(24.33±1.36)%、(31.67±1.24)%、(36.93±2.40)%]与B组比较则差异无统计学意义。各组活化easpase-3、Cyt-C蛋白表达量均随H:0:作用时间延长而逐渐增加;B组各时间点活化easpase-3、Cyt-c蛋白表达量均较A组明显增加;c组活化easpase-3蛋白表达量(灰度值)较B组明显减少(2h:0.250±0.039比0.650±0.072,6h:0.470±0.080比0.960±0.118,12h:0.680±0.099比1.830±0.220,均P〈O.05);Cyt-c蛋白表达量(灰度值)也较B组明显减少(2h:0.250±0.074比0.390±0.069,6h:0.340±0.043比0.670±0.120,12h:0.470±0.072比1.360±0.112,均P〈O.05);D组活化caspase-3蛋白表达量(0.720±0.052、1.060±0.109、1.880±0.159)、Cyt-C蛋�

关键词:凋亡肺泡上皮细胞过氧化氢大鼠

单位:遵义医学院附属医院重症医学科 贵州563000

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