摘要：目的：探讨调控对氧磷酶1（PON1）基因对急性敌敌畏中毒小鼠肝组织氧化损伤的保护作用。方法实验1：将12只雄性Balb/c小鼠按随机数字表法分为对照组、对照绿色荧光蛋白慢病毒（Lv-GFP）组、重组PON1慢病毒（Lv-PON1）组3组，每组4只。经尾静脉分别注射转染2＆#215;107 TU的Lv-GFP或Lv-PON1慢病毒，对照组给予等量生理盐水。分别于0、1、3、5、7、9 d取眼底静脉血，检测血清PON1活性；转染3 d取肝组织，分别用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和蛋白免疫印迹试验（Western Blot）检测PON1 mRNA和蛋白表达。实验2：另将96只雄性Balb/c小鼠按随机数字表法分为对照组、敌敌畏染毒组、Lv-GFP干预组、Lv-PON1干预组4组，每组24只。经尾静脉分别注射转染Lv-GFP或Lv-PON1慢病毒后3 d，腹腔注射敌敌畏溶液9 mg/kg染毒，对照组给予等量生理盐水。各组分别于染毒后6、12、24、48 h麻醉处死6只小鼠取肝组织，RT-PCR检测PON1 mRNA、核转录因子E2相关因子2（Nrf2） mRNA表达；Western Blot检测PON1蛋白表达；化学比色法检测丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量；双抗夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性。结果实验1：Lv-PON1转染正常小鼠后，血清PON1活性逐渐升高，自3 d起维持在较高水平；而对照组和Lv-GFP组血清PON1活性均处于正常低水平状态。转染3 d肝组织PON1 mRNA和蛋白表达均显著高于对照组和Lv-GFP组。实验2：与对照组相比，敌敌畏染毒组染毒后6 h肝组织PON1 mRNA和蛋白表达、 Nrf2 mRNA表达、GSH、SOD、CAT水平即明显降低〔PON1 mRNA（灰度值）：0.237±0.075比0.674±0.011，PON1蛋白（灰度值）：0.602±0.086比0.998±0.124，Nrf2 mRNA（灰度值）：0.089±0.012比0.126±0.010，GSH（mg/g）：3.84±0.33比5.52±0.40，SOD（μg/g）：0.383±0.040比0.564±0.052， CAT（ng/g）：7.32±1.28比12.46±1

关键词：对氧磷酶 中毒 敌敌畏 肝损伤 氧化应激 

单位：温州医科大学附属第一医院急诊医学中心 浙江温州325000