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乙酰胆碱对脂多糖诱导肺泡巨噬细胞炎症反应的影响

刘芬 赵宁 李东海 曾振国 邵强 彭菲菲 王燕 钱克俭 中华危重病急救医学 2015年第10期

摘要:目的:观察乙酰胆碱(ACh)对脂多糖(LPS)诱导肺泡巨噬细胞炎症反应模型大鼠胆碱能抗炎通路的作用,以及胆碱酯酶抑制剂毒扁豆碱(Phy)对ACh抗炎作用的影响。方法体外培养NR8383大鼠肺泡巨噬细胞株并分为空白对照组、LPS组(1 mg/L LPS刺激12 h)、LPS+ ACh组(LPS刺激前加入终浓度0.01、0.1、1、10、100μmol/L的ACh处理5 min)、 LPS+Phy组(LPS刺激前加入1 mmol/L的Phy处理5 min)、 LPS+ACh+Phy组(LPS刺激前加入1 mmol/L Phy及10μmol/L Ach分别处理5 min)5组。收集各组细胞上清液,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β、IL-6)的含量;同时测定乙酰胆碱酯酶(AChE)活性。结果① LPS组细胞上清液中TNF-α(ng/L:605.09±57.13比34.07±8.62)、IL-1β(ng/L:377.09±28.55比32.33±10.62)、IL-6(ng/L:558.04±77.45比42.62±11.21)含量均较空白对照组显著升高(均P<0.05),证实肺泡巨噬细胞炎症反应模型构建成功。②与LPS组相比,终浓度0.01、0.1和1μmol/L的ACh对 LPS刺激的肺泡巨噬细胞上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6含量影响较小(均P>0.05);而终浓度10μmol/L及100μmol/L的ACh可显著降低细胞上清液中TNF-α(ng/L:451.19±30.67、332.19±32.19比604.96±22.56)、IL-1β(ng/L:261.08±24.78、143.98±28.39比367.06±10.44)、IL-6(ng/L:342.75±54.60、235.48±29.75比562.69±63.34)的含量(均P<0.05)。③ LPS组细胞上清液中AChE活性较空白对照组显著增加(kU/L:5.21±0.63比3.09±0.10,P<0.05);与LPS组相比,给予1 mmol/L胆碱酯酶抑制剂Phy预处理可成功抑制AChE的活性(1.51±0.12比5.21±0.63,P<0.05)。④与LPS+ ACh组相比,LPS+ ACh+ Phy组可显著降低细胞上清液中TNF-α(ng/L:183.17±35.44比451.19±30.67)、IL-1β(ng/L:91.49±12.27比261.08±24.78)、IL-6(ng/L:108.17±22.82比342.75±54.60)的含量(均P

关键词:乙酰胆碱脂多糖肺泡巨噬细胞炎症反应

单位:南昌大学第一附属医院重症医学科 江西南昌330006 南昌大学第一附属医院神经外科 江西南昌330006

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