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心肺复苏大鼠心肌组织CyPA信号通路的研究

王峪 刘剑虹 王卫利 沈鹏 沈中阳 中华危重病急救医学 2015年第12期

摘要:目的观察心肺复苏(CPR)后大鼠心肌组织亲环素A(CyPA)信号通路的变化。方法将68只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组(n=8)及心搏骤停(CA)即刻组、CPR即刻组和CPR后15、30、60、120min组,每个时间点10只。利用呼气末夹闭气管导管模拟窒息后给予机械通气、心脏按压及静脉注射肾上腺素恢复自主循环(ROSC)建立CA—CPR模型。分别于各时间点检测大鼠血流动力学;取腹主动脉血及心肌组织,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清CyPA和CD147水平,采用免疫组化及实时定量反转录-聚合酶链反应(RT—qPCR)检测心肌组织CyPA和CD147的阳性表达及mRNA表达;采用蛋白质免疫印迹试验(WesternBlot)检测心肌组织基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)和髓过氧化物酶(MPO)的蛋白表达;苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察心肌组织中性粒细胞浸润情况。结果CA即刻大鼠心率降至0,动脉压降低;CPR即刻动脉压即升高至正常,随时间延长,大鼠心率约在30min时恢复;肾上腺素用量50-60嵋,ROSC时间1~4min。与假手术组比较,随ROSC时间延长,CPR120min内血清CyPA和CD147水平逐渐升高,120min达峰值[CyPA从(786.11±3.93)μg/L升至(2001.80±10.61)倒L,CD147从(2.94±0.02)μg/L升至(5.99±0.02)μg/L,P〈0.05或P〈0.01];心肌组织CyPA和CD147的mRNA表达(A值)逐渐升高,120min达峰值(以假手术组为1,CyPA的相对表达量达2.42±0.05,CD147的相对表达量达1.88±0.10,均P〈0.01);镜下观察免疫组化结果显示,胞膜呈褐色的阳性细胞逐渐增多、变深,说明CyPA和CD147表达均增加;心肌组织MMP-2、MMP-9、MPO的蛋白表达逐渐升高,120min时达峰值[MMP-2(灰度值)从0.396±0.021升至0.879±0.020,MMP-9(灰度值)从0.372±0.009升至0.819±0.012,MPO(灰度值)从0.176±0.005升�

关键词:心肺复苏心肌组织亲环素acd147

单位:天津市第一中心医院急诊科 300192 天津市第一中心医院器官移植中心 300192 天津市器官移植重点实验室

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