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富氢液对创伤性颅脑损伤大鼠大脑皮质水通道蛋白1表达的影响

陈先俊 王迪芬 刘颖 袁佳 张海玲 中华危重病急救医学 2016年第05期

摘要:目的探讨富氢液对大鼠创伤性颅脑损伤(TBI)后脑水肿及水通道蛋白1(AQP1)表达的影响。方法将90只成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术(Sham)组、TBI模型组和富氢液干预组,每组30只。采用颅脑撞击法制备TBI模型;Sham组只开颅窗、骨蜡封闭缝合,不撞击。富氢液干预组于制模后经腹腔注射富氢液5mL/kg,Sham组和TBI组注射等量生理盐水,均每日1次,共5d。各组分别于术后6、12、24、48h和5d取6只大鼠进行神经损伤严重度评分(NSS);取大脑皮质,光镜下观察脑组织病理学变化;采用免疫组化染色,镜下观察大脑皮质AQP1阳性表达;采用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测大脑皮质AQP1 mRNA表达;采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测大脑皮质AQPl蛋白表达。结果①Sham组各时间点NSS评分均为0分;TBI组NSS评分随时间延长呈升高趋势,24h达峰值后逐渐降低;富氢液干预后可明显降低NSS评分,24h与TBI组比较最为明显(分:9.83±2.78比13.50±2.42,P〈0.05)。②光镜下显示,TBI组大鼠6h大脑皮质神经细胞排列即明显紊乱,24h脑水肿和出血最为严重,之后水肿逐渐消退;各时间点软脑膜处AQPl阳性表达明显增加,以24h时最为明显。富氢液干预组术后12h~5d脑组织病理学改变均较TBI组明显减轻;软脑膜处AQPl阳性表达较TBI组明显减少。③与Sham组比较,TBI组脑组织AQP1的mRNA和蛋白表达均随时间延长逐渐升高,并于24h达峰值[AQP1 mRNA(2-△△Ct):7.50±0.26比1,AQP1蛋白(灰度值):1.986±0.110比0.336±0.034,均P〈0.05],之后逐渐下降;富氢液干预可明显下调脑组织AQP1的mRNA和蛋白表达[24hAQP1 mRNA(2-△△Ct):5.40±0.21比7.50±0.26,24hAQP1蛋白(灰度值):1.246±0.137比1.986±0.110,均P〈0.05]。结论TBI大鼠大脑皮质AQP1 mRNA�

关键词:颅脑损伤创伤性水通道蛋白1脑水肿富氢液

单位:贵州医科大学附属医院重症医学科 贵州贵阳550004

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