摘要：【摘要】目的探讨盐酸（HCl）刺激与机械牵张诱导人肺上皮细胞向间质转分化以及对透明质酸（HA）分泌的影响。方法体外培养人肺上皮细胞株BEAS-2B，取对数生长期的细胞分为磷酸盐缓冲液（PBS）＋静止组、HCl＋静止组、PBS＋牵张组、HCl＋牵张组。采用FX-5000T细胞应力加载系统向两个牵张组BEAS-2B细胞持续48h施加20％振幅、频率0．33Hz、正弦波的机械牵张。分别于牵张前后用倒置显微镜观察细胞形态变化；用蛋白质免疫印迹试验（WesternBlot）检测细胞上皮标志物E-钙黏蛋白和细胞角蛋白-8（CK-8）以及间质标志物波形蛋白和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的蛋白表达；用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞培养上清中HA分泌量。结果①镜下观察显示：PBS＋静止组BEAS-2B细胞呈卵圆形，且细胞紧密相连，细胞间存在极性；单纯HCl刺激后细胞形态无明显变化；而单纯给予机械牵张48h后细胞由卵圆形变成长梭形，细胞间隙明显增大；给予HCl刺激和机械牵张双重打击后细胞形态改变更为显著。②WesternBlot显示：与PBS＋静止组比较，单纯或联合HCl和机械牵张48h后BEAS-2B细胞E-钙黏蛋白、CK-8表达均下调，波形蛋白、α-SMA表达均上调，以HCl＋牵张组表达变化更为明显[以PBS＋静止组表达量（灰度值）为基数1，E-钙黏蛋白为0．16±0．08比1，CK-8为0．10±0．03比1，波形蛋白为3．35±0．38比1，α-SMA为3．10±0．45比1，均P〈0．01]。③ELISA试验显示：与PBS＋静止组比较，单纯HCl刺激或机械牵张均可诱导BEAS-2B细胞分泌HA（μg／L：55．763±0．687、63．005±0．493比49．876±1．867）；而HCl与机械牵张联合刺激后细胞培养上清液中HA分泌量增加更为显著（μg／L：78．220±1．085比49．876±1．867，P〈0．01）。结论HCl或机械牵张均能诱导人肺上皮细胞发生上皮向间质转分化，同时增加HA的分�

关键词：机械牵张 上皮间质转分化 透明质酸 肺纤维化 肺上皮细胞 

单位：广州医科大学附属第一医院; 广州呼吸疾病研究所; 呼吸疾病国家重点实验室; 广东广州510120; 广州医科大学附属第一医院; 广州呼吸疾病研究所; 医院感染管理科; 广东广州510120