摘要：目的探讨Hippo信号通路对小鼠骨髓来源间充质干细胞（mMSCs）抗氧化应激损伤的调控作用。方法直接贴壁法分离C57BL/6小鼠原代mMSCs，通过流式细胞仪检测和诱导其成骨、成软骨、成脂分化并进行鉴定。通过2-脱氧-D-葡萄糖（2-DG）或Hippo信号通路高效特异选择性抑制剂XMU-MP-1调节Hippo信号通路。通过不同浓度双氧水（H2O2）共培养来模拟氧化应激损伤，用四甲基偶氮唑盐（MTT）法评估mMSCs存活情况；蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测mMSCs中Hippo信号通路关键组分表达；Western Blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax的表达。结果2-DG呈浓度依赖性地激活Hippo信号通路，其浓度为5 mmol/L时效应最明显〔与空白对照组比较，大肿瘤抑制基因1（LATS1）蛋白（灰度值）：2.33±0.25比0.98±0.03，磷酸化Yes相关蛋白（p-YAP）/YAP蛋白比值（灰度值）：2.30±0.35比1.01±0.05，14-3-3蛋白（灰度值）：2.19±0.40比0.99±0.04，均P〈0.05〕；100 nmol/L的XMU-MP-1可抑制Hippo信号通路活化〔与空白对照组比较，LATS1蛋白（灰度值）：0.69±0.10比0.98±0.03，p-YAP/YAP蛋白比值（灰度值）：0.65±0.06比1.01±0.05，14-3-3蛋白（灰度值）：0.75±0.11比0.99±0.04，均P〈0.05〕。H2O2呈浓度依赖性抑制mMSCs存活，0.1 mmol/L是其抑制mMSCs存活的最低浓度〔与空白对照组比较，mMSCs存活率：（81.25±11.85）%比（100.44±12.39）%，P〈0.05〕。H2O2呈浓度依赖性抑制Hippo信号通路，0.1 mmol/L是其抑制Hippo信号通路的最低浓度〔与空白对照组比较，LATS1蛋白（灰度值）：0.75±0.06比1.01±0.09，p-YAP/YAP蛋白比值（灰度值）：0.69±0.05比0.98±0.05，均P〈0.05〕，并可导致Bcl-2/Bax比值下降（灰度值：0.48±0.18比1.06±0.09，P〈0.05）。与0.1 mmol/L H2O2组比较，5 mmol/L的2-DG预处理可以通过活化Hippo信号通路〔LATS1蛋白（灰度值）：0.95±0.05比0.64±0.06，p-YAP/YAP蛋白�

关键词：hippo信号通路 间充质干细胞 抗氧化应激损伤 凋亡相关蛋白 bax 

单位：南京医科大学附属无锡人民医院重症医学科; 江苏无锡214023