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一个可能的与人端粒结合因子相互作用蛋白Tara的分离和克隆

蓝建平; 罗依; 朱园园; 孙洁; 来晓瑜; 李静远; 余建; 施继敏; 林茂芳; 黄河 浙江大学学报·医学版 2004年第06期

摘要:目的:分离和鉴定端粒结合因子(TRF1)免疫共沉淀蛋白复合物并克隆其基因.方法:以TRF1抗体应用免疫共沉淀方法,从细胞蛋白抽提物中分离TRF1蛋白复合物,并作蛋白质肽指纹谱鉴定;应用温度梯度PCR,从人cDNA文库中扩增目的基因,并构建pEGFP-C2真核表达载体;核苷酸测序和Western blot验证目的基因序列和表达载体.结果:从TRF1免疫沉淀复合物中分离出了Tara蛋白;人cDNA文库中PCR扩增所得产物为1.7 kb,与Tara基因CDS序列同源性为99.9%;GFP/Tara融合蛋白约100 kD,Tara在间期HeLa细胞中弥散表达于胞浆,而有丝分裂细胞则定位于整个细胞.结论:Tara是一个可能的TRF1相互作用蛋白,其作用机制需进一步实验研究.

关键词:端粒端粒结合因子基因tara免疫共沉淀

单位:浙江大学医学院; 附属第一医院血液科; 浙江; 杭州; 310003

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浙江大学学报·医学版

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