摘要：目的：预测及筛选问号钩端螺旋体（简称钩体）属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞（T／B）联合表位，了解不同基因型LipL41s差异T／B联合表位的免疫反应性差别。方法：采用生物信息学方法预测LipL41／1和LipL41／2分子中T／B联合表位。采用PCR扩增候选T／B联合表位片段，采用噬菌体展示及SDS—PAGE等技术获得含不同T／B联合表位的重组PⅢ。分别以rLipL41／1和rLipL41／2抗血清、黄疸出血群赖型赖株全菌抗血清和钩体患者血清为一抗，采用WesternBlot检测各抗血清与各重组PⅢ免疫杂交反应性。结果：根据预测结果选择了LipL41s中8个共有或差异T／B联合表位。经PCR扩增获得了上述T／B联合表位片段。各T／B联合表位片段均准确插入噬菌体PⅢ蛋白N端并有效表达。各抗血清均能识别上述8个T／B联合表位，但其Western Blot杂交信号强度存在差异，其中共有T／B联合表位LipL41／1—30和LipL41／1—233与不同抗血清的信号较强且稳定。结论：所选择的8个T／B联合表位均为LipL41的有效抗原表位。共有T／B联合表位LipL41／1—30和LipL41／1—233可作为钩体MAP疫苗的首选抗原表位。差异T／B联合表位LipL41s-89和LipL41s-299与不同抗血清有免疫交叉现象。

关键词：钩端螺旋体 噬菌体展示 免疫学鉴定 

单位：浙江大学医学院病原生物学系 浙江杭州310058 浙江大学附属第一医院传染病诊治国家重点实验室基础医学微生物学研究室 浙江杭州310003