钩端螺旋体（简称钩体）病是重要的人兽共患传染病之一，但其致病机制至今不明，目前也无可预防所有问号钩体血清群、型感染的通用型疫苗。细菌耐药性一直是医学微生物学和传染病学关注的重大问题之一，近年发现二元信号传导系统（TCS）与某些细菌耐药性密切相关。根据近年国内外有关研究资料，文中就问号钩体致病物质及其作用机制、相关信号传...
三聚氰胺因为最近的奶粉事件成为食品公共安全的焦点，所以针对三聚氰胺及其同系物三聚氰酸的生物学效应和毒理学研究作一综述，主要从理化性质、代谢、毒理机制，以及检测等方面进行总结。三聚氰胺和三聚氰酸本身的急性毒性作用很低，体内为惰性代谢，大部分以原型从尿液排出，大剂量应用时主要对肾脏产生毒性，产生结石，急性肾衰和结石相关的...
目的：了解FasL／Fas途径参与问号钩端螺旋体（简称钩体）诱导细胞凋亡及其FasL／Fas表达水平变化。方法：建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株感染小鼠单核一巨噬细胞J774A．1模型。采用DAPI染色法观察问号钩体56601株感染细胞凋亡的形态学特征，流式细胞术定量检测感染细胞的凋亡率及FasL中和抗体对细胞凋亡的阻断作用。PE标记抗小鼠FasL或Fas...
目的：了解问号钩端螺旋体（钧体）诱导小鼠单核巨噬样细胞（J774A．1）凋亡的作用，以及caspase-3、-6活化对凋亡的影响。方法：建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株J774A．1细胞感染模型。采用FITC—AnnexinV／PI荧光标记流式细胞术检测细胞凋亡或坏死情况。分别采用荧光比色法和Western Blot，检测感染细胞caspase-3、-6活性及其底物（PARA和L...
目的：确定问号钩端螺旋体（简称钩体）株携带侵袭相关mce基因情况，原核表达mce基因并制备其抗血清，了解问号钩体感染细胞前后mce基因转录水平的变化。方法：采用PCR扩增13株问号钩体和1株双曲钩体全长mce基因片段，T—A克隆后测序。采用基因工程技术构建mce基因原核表达系统，SDS—PAGE联合Bio—Rad凝胶图象分析系统检查目的重组蛋白rMce表达...
目的：了解问号钩端螺旋体（简称钩体）fliR基因的致病性。方法：分别从问号钩体黄疸出血群56601株DNA和pET42a质粒中扩增fliR基因和kana基因。构建fliR基因自杀质粒，并设计和合成特异性siRNA。采用分别基于自杀质粒的基因敲除、基于siRNA的基因沉默技术构建问号钩体fliR基因突变株，并用PCR、测序、半定量RT-PCR进行鉴定。采用小鼠单核-巨噬细...
目的：了解问号钩端螺旋体（简称钩体）对细胞外基质（ECM）分子的黏附作用及其差异。方法：建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株对J774A．1、L929和Vero细胞感染模型，采用Fontana镀银染色法及显微镜检查法，了解问号钩体56601株黏附细胞ECM的效果。建立多种ELISAs，检测问号钩体56601株黏附ECM分子层粘连蛋白（LN）、纤维纤连蛋白（FN）、核心...
目的：预测及筛选问号钩端螺旋体（简称钩体）属特异性外膜蛋白LipL41有效T和B细胞（T／B）联合表位，了解不同基因型LipL41s差异T／B联合表位的免疫反应性差别。方法：采用生物信息学方法预测LipL41／1和LipL41／2分子中T／B联合表位。采用PCR扩增候选T／B联合表位片段，采用噬菌体展示及SDS—PAGE等技术获得含不同T／B联合表位的重组PⅢ。分别...
目的：建立基于问号钩端螺旋体（简称钩体）rLipL32／1-LipL21-OmpLl／2融合抗原的ELISAs，并应用于检测钩体病患者血清特异性IgG和IgM。方法：采用显微镜凝集试验（MAT），检测钩体病患者血清及rLipL32／1-LipL21-OmpL1／2兔抗血清对我国问号钩体参考标准株的效价。分别以rLipL32／1-LipL21-OmpL1／2、rLipL32／L、rLipL21和rOmpL1／2为包被抗...
目的：构建问号钩端螺旋体（简称钩体）lipL32／1-lipL21-OmpL1／2融合基因及其原核表达系统，优化目的产物表达条件并对表达产物免疫原性进行鉴定。方法：采用连接引物PCR构建lipL32／1-lipL21-OmpLl／2融合基因，并用常规基因工程方法建立其原核表达系统。采用SDS—PAGE及Bio—Rad凝胶图象分析系统，检测目的重组蛋白rLipL32／1-LipL21-OmpL1...
目的：构建肺炎链球菌ciaH和ciaR基因的原核表达系统，探讨ciaH和CiaR封闭后细菌耐药性变化。方法：采用PCR扩增全长ciaH和ciaR基因，以常规基因工程技术建立其原核表达系统。采用SDS—PAGE及Bio—Rad凝胶图象分析系统检测目的重组蛋白rCiaH和rCiaR表达量。制备rCiaH和rCiaR兔抗血清及其IgG。检测IgG胞外或胞内封闭肺炎链球菌菌株CiaH和CiaR后，...
目的：探讨G4PAMAM／VEGFASODN复合物体外对乳腺癌细胞MDA—MB-231VEGF、VEGF mRNA表达的影响及血管内皮细胞生长的抑制作用。方法：用透射电镜观测G4PAMAM／VEGFASODN的粒径，在不同的酸碱度下观察G4PAMAM／VEGFASODN的稳定性；将G4PAMAM／VEGFASODN进行体外转染，流式细胞仪测定其转染率，激光共聚焦检测转染阳性细胞，MTT法检测转染后细胞的...
目的：探讨牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）脂多糖（LPS），诱导人口腔上皮细胞KB和人牙龈成纤维细胞HGF-1及人单核-巨噬样细胞THP-1，分泌炎性细胞因子的能力及其差异。方法：采用酚水法提取PgATCC33277株的脂多糖（Pg—LPS）。采用鲎试验和红外光谱对提取的Pg—LPS进行鉴定。采用ELISA试剂盒，定量检测不同浓度和时间Pg—LPS...
目的：探讨Ref-1在阿尔茨海默病（AD）大鼠发病中的变化及其可能机制。方法：采用Aβ25-35单次侧脑室注射诱导AD大鼠模型，Y迷宫测定大鼠行为学变化，免疫组化法检测建模后4d、7d和14d时痴呆组、对照组大鼠海马CA1区Ref-1的表达。结果：①Aβ注射7d、14d后，痴呆组大鼠达到学习标准的训练次数、错误次数和全天总反应时间较对照组均明显增加（P〈0...
目的：通过测定腹泻型肠易激综合征（D—IBS）患者外周血T淋巴细胞亚群及血清Zn、Se、Fe、Cu含量变化，旨在探讨IBS的可能病因及发病新机制。方法：随机抽取30例D—IBS患者和30例健康志愿者的外周血标本，采用流式细胞技术，分别测定CD3、CD4、CD8T淋巴细胞亚群百分比，并计算CD4／CD8比值；采用原子吸收光谱法，测定血清Zn、Fe、Cu水平，用原子...
目的：探讨输卵管间质部妊娠（间质部妊娠）的诊断和治疗方法，旨在为临床诊治提供线索。方法：分析2004年1月至2007年6月收治的4例疑难间质部妊娠患者的临床资料。结果：4例患者术前均误诊且均未生育，其中位年龄为30岁，中位停经时间为48天，术前中位血hCG值为3245．5IU／L。2例患者行腹腔镜检查后确诊为间质部妊娠，其中1例在腹腔镜监护下经...
贝叶斯统计学通过构建分层贝叶斯模型，结合马尔科夫链一蒙特卡罗方法，可以有效地对包括小范围区域疾病分布图的描绘、疾病地理聚集性分析研究和疾病地理相关性研究在内的时空非独立数据进行分析。目前贝叶斯空间分析模型已发展成多类的分析方法，包括近年来充分发展和得到应用的BYM模型、联合随机模型、半参数贝叶斯统计及移动性均化模型等。...
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