摘要：目的：研究抗氧化性诱导剂（激活剂）叔丁基对苯二酚（tert-butylhydroquinone,tBHQ）和莱菔硫烷[1-异硫氰酸-（4R,S）-（甲基亚磺酰基）丁烷]（sulforaphane,SFN）对人结肠癌细胞株Caco2的Nrf2-ARE信号通路的影响。方法：选取不同的时间点,分别用20μmol/L tBHQ和5μmol/L SFN处理Caco2细胞,从蛋白质水平、mRNA水平和蛋白质定位3个方面,分别用Westernblotting、real-time PCR和免疫荧光染色（immunoflourescence staining,IF）方法来检测Nrf2以及其调控基因AKR1C1和NQO1（Western blotting,real-time PCR）表达的变化。结果：细胞核中Nrf2基因表达的最佳时间点为加药诱导后8 h,细胞质中Nrf2调控基因AKR1C1和NQO1表达的最佳时间点为加药诱导后16 h。tBHQ的诱导作用在撤去之后仍能持续4 h。结论：本研究使用激活剂tBHQ和SFN对Caco2细胞的Nrf2-ARE信号通路进行诱导,取得了最佳的诱导时间点,并研究了撤去tBHQ后持续诱导时间,为今后在肿瘤化学预防研究中,筛选合适的激活剂及其剂量和使用次数提供了重要依据,也为研究Nrf2-ARE信号通路的抑制剂提供了重要信息。

关键词：结肠肿瘤 转录因子 基因表达 反应元件 核胞浆转运蛋白类 

单位：浙江大学医学院生物化学与遗传学系 浙江杭州310058