摘要：目的:构建人STUB1基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体并进行鉴定.方法:针对筛选确定的人STUB1 基因RNAi有效靶点序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经Age I 和EcoR I 酶切后的pMagic 4.0载体连接,产生短发卡RNA 慢病毒载体.PCR筛选阳性克隆,测序鉴定,并包装成慢病毒颗粒.结果:PCR鉴定与DNA测序证实,合成的含STUB1 shRNA慢病毒载体寡核苷酸链插入正确.STUB1 shRNA慢病毒载体在293T细胞中成功包装成慢病毒颗粒.结论:成功构建人STUB1基因RNAi慢病毒载体以及包装成功慢病毒颗粒,为研究STUB1在胶质瘤发生发展过程中相关信号通路的作用,提供了稳定感染细胞的载体.

关键词：基因 rna干扰 慢病毒载体 构建与鉴定 rna 

单位：哈尔滨医科大学 附属第四医院神经内科 黑龙江 哈尔滨 150001 哈尔滨医科大学 附属第一医院神经内科 黑龙江 哈尔滨 150001 哈尔滨医科大学 附属第四医院泌尿外科 黑龙江 哈尔滨 150001