摘要:目的HVEM基因突变体腺病毒载体对大鼠混合淋巴细胞反应(MLR)的影响。方法RT—PCR获得人HVEM的cDNA,使其与uGHT分子结合的表位点突变,保留与BTLA结合的关健位点。构建经修饰的HVEM基因的复制缺陷型腺病毒载体Adv—mHVEM-IRES2-EGFP并对其进行鉴定和转染效率测定。将该载体用于混合淋巴细胞反应中,观察对淋巴细胞增殖的影响。结果成功构建HVEM突变体和EGFP复制缺陷型腺病毒载体,经过测序与预期一致,体外培养细胞转染效率达到95%以上。该载体能够对大鼠MLR有明细的抑制作用。结论构建的腺病毒载体能够共表达目的基因的产物HVEM突变体和EGFP蛋白,对体外细胞具有高效转染能力。该载体能够对大鼠混合淋巴细胞反应有明显的抑制作用。
关键词:共刺激信号 hvem 突变体 btla腺病毒表达载体
单位:第三军医大学西南医院泌尿外科; 重庆400038; 第三军医大学新桥医院泌尿外科; 重庆400037
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