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体外培养大鼠视网膜神经节细胞缺氧条件下HIF—1α动态表达及意义

陈鹏; 贺翔鸽 重庆医学 2006年第15期

摘要:目的探讨体外培养Long Evans大鼠视网膜神经节细胞缺氧条件下缺氧诱导因子1α(hypoxia induction factor 1α,HIF-1α)表达变化及损伤机制。方法正常对照组视网膜神经节细胞在常规条件下、缺氧组在1%氧浓度下分别培养1、3、12、24h。采用RT—PCR法检测神经节细胞HIF-1α mRNA水平,蛋白质免疫印迹法测定HIF-1α蛋白水平表达,免疫荧光法进行HIF-1α细胞内定位检测,分别采用黄嘌呤氧化酶法、硫代戊巴比妥酸法、酶标双抗夹心免疫吸附法ELISA方法测定培养液SOD活性、MDA含量及TNFoa水平检测。结果正常对照组神经节细胞未见HIF-1α mRNA及蛋白表达,缺氧组HIF-1α mRNA水平、蛋白表达随缺氧时间延长显著升高(P〈0.01),其峰值分别在缺氧后3h和12h。免疫荧光法见缺氧组HIF-1α表达于神经节细胞胞浆。缺氧组细胞培养液SPD活性随缺氧时间时间延长显著降低,MDA含量及TNF-α含量显著升高,差异有统计学意义(P〈0.05、P〈0.01)。结论体外培养视网膜神经节细胞在缺氧条件下其HIF-1α mRNA水平及蛋白表达呈上升后降低趋势,其表达变化与缺氧时培养液中脂质过氧化反应逐渐增强、抗氧化能力降低及炎性因子水平上升有关。

关键词:神经节细胞超氧化物歧化酶丙二醛

单位:第三军医大学大坪医院眼科; 重庆400042

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