摘要:目的 建立HBVX-HCVC融合蛋白细胞表达模型,并探讨其对细胞胰岛素样生长因子-1的影响。方法 双酶切质粒pXT1-X,得到完整的HBVX基因片段后,将其插入到质粒PBK—CMV和PBK—HCVC的相应酶切位点,得到重组质粒PBK-X和PBK—X—C;再将质粒PBK—CMV、PBK-X、PBK—HCVC和PBK—X—C分别导入肝癌细胞株HepG2中,G418筛选,RT-PCR、蛋白印迹鉴定HBVX和HCVC蛋白表达。流式细胞仪、蛋白印迹检测IGF-1受体蛋白表达。结果 质粒PBK—CMV、PBK—X、PBK—HCVC和PBK-X-C在HepG2细胞中有稳定表达。表达融合蛋白的细胞的胰岛素样生长因子-1受体活性较转染空载体的细胞及单独表达HBVX、HCVC蛋白的细胞明显升高。结论 HBVX-HCVC融合蛋白能显著上调胰岛素样生长因子-1受体活性,提示HBV、HCV可能具有协同致癌作用。
关键词:乙型肝炎病毒 丙性肝炎病毒 x基因 核心基因
单位:第三军医大学大坪医院消化内科; 重庆400042
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