摘要:目的构建表达载体pEGFP—Myocl,为转染人脐血间充质干细胞,实现其成平滑肌分化提供条件。方法通过聚合酶链反应(PCR)以pAdApt.myocl为模板制备Myocardin目的基因,通过pEGFP—N1载体线性化以及连接、转化等方法构建真核表达载体pEGFP—Myocl,并通过酶切和测序对其序列进行鉴定。结果正确构建了真核重组表达质粒pEGFP—Myocl,基因测序结果表明,与GeneBank公布的已知序列完全一致。结论成功构建的真核重组表达载体pEGFP—Myocl,为后续实验提供了基础。
关键词:聚合酶链反应 myocardin 基因克隆
单位:第三军医大学西南医院妇科科; 重庆400038; 第三军医大学新桥医院麻醉科; 重庆400037
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