摘要：目的构建表达人脑源性神经生长因子（hBDNF）基因的真核细胞表达载体，并且观察重组质粒在真核细胞中的表达情况。方法采用PCR方法从健康人基因组中扩增出该基因，将hBDNF的PCR产物用XhoI和SalⅠ双酶切后克隆到用XhoⅠ和SalⅠ双酶切的带有EGFP和内部核糖体转入位点（IRES）的真核细胞表达载体pIRES2-EGFP中。对重组质粒进行双酶切和质粒测序鉴定后，采用阳离子脂质体Lipofectamine2000将重组的质粒转染至真核细胞中，用RT-PCR和荧光显微镜检测基因在细胞中表达的情况。结果双酶切和质粒测序结果证明hBDNF已正确地克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中，质粒能在细胞中正常表达。结论成功构建了EGFP／hBDNF表达载体，为应用hBDNF治疗中枢神经系统疾病奠定坚实的基础。

关键词：人脑源性神经生长因子 重组质粒 转染 

单位：重庆医科大学附属第二医院神经外科 400010 佳木斯大学神经科学研究所 154003 重庆医科大学附属第一医院神经外科 400016