摘要：目的建立一种能大量分离人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的体外培养方法，为血管内皮细胞的大规模体外实验研究奠定基础。方法比较0．25％胰酶、0．1％Ⅰ型胶原酶、0．25％胰酶与0．1％Ⅰ型胶原酶（1：1）3种消化方法分离HUVECs的细胞数量和活细胞率的差异。观察血管内皮细胞生长因子（VEGF）对细胞生长的影响。细胞鉴定采用形态学观察和免疫荧光法检测。结果O．1％Ⅰ型胶原酶单独或混合0．25％胰酶消化分离细胞数量较多、活细胞率较高（P〈0.05）。VEGF能明显促进细胞增殖能力，延长细胞自然生长时间。细胞呈单层“铺路石”样排列，免疫荧光细胞化学法染色，激光共聚焦检测可见胞质中绿色荧光颗粒。结论 Ⅰ型胶原酶与胰酶混合消化HUVECs是获取血管内皮细胞的一种经济且效果较好的方法，添加VEGF能明显促进细胞增殖．可用于构建体外研究血管内皮细胞的模型。

关键词：脐静脉 内皮细胞 细胞培养 

单位：第三军医大学军事预防医学院营养与食品卫生学教研室 重庆市营养与食品安全重点实验室 重庆400038