摘要:目的构建能稳定表达pCDR1Th表位和CTLA4Ig融合基因的真核表达载体,探讨其在小鼠体内的表达并对表达产物进行鉴定。方法用TouchdownPCR法扩增CTLA4Ig基因,同时引入pCDR1Th表位。将PCR产物连接真核表达载体pcDNA3.1(+),构建pcDNA3.1(+)CTLA4Ig—pCDR1。将构建表达CTLA4Ig—pCDR1减毒鼠伤寒沙门菌SL7207喂饲BALB/c小鼠,取脾脏进行免疫组化鉴定重组蛋白在动物体内的表达。结果酶切鉴定和基因序列测定显示重组质粒构建成功。重组蛋白在BALB/c小鼠脾脏免疫细胞胞浆中有阳性表达。结论成功构建了能稳定表达pCDR1Th表位和CTLA4Ig融合基因的真核表达载体。
关键词:pcdr1 th表位 ctla4ig融合基因 基因表达
单位:第三军医大学西南医院皮肤科 重庆400038 重庆医科大学附属第二医院皮肤科 400010 第三军医大学新桥医院检验科 重庆400037
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