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可溶性猪软骨Ⅱ型胶原蛋白的提取与鉴定

宁志刚 王富友 崔运利 熊娟 杨柳 重庆医学 2011年第10期

摘要:目的从猪膝关节软骨中提取纯化Ⅱ型胶原蛋白,并对其进行鉴定。方法选择猪膝关节软骨为提取原料,用盐酸胍去除蛋白多糖、胃蛋白酶两步消化、氯化钠盐析、超纯水透析、离心浓缩等方法提取纯化Ⅱ型胶原蛋白;采用SDS-PAGE、氨基酸成分分析对提取的Ⅱ型胶原蛋白进行鉴定;利用冻干的方法计算提取的浓度。结果SDS-PAGE电泳结果显示提取的Ⅱ型胶原蛋白分子量约120kD;氨基酸成分分析显示甘氨酸、脯氨酸和丙氨酸含量最高,并且可以检出羟脯氨酸、羟赖氨酸,符合Ⅱ型胶原特征;该法提取的Ⅱ型胶原蛋白浓度为66mg/mL。结论从猪关节软骨提取的Ⅱ型胶原蛋白纯度高,方法简便,提取的胶原蛋白浓度更高。

关键词:软骨电泳聚丙烯酰氨凝胶

单位:第三军医大学西南医院关节中心 重庆400038

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