摘要：目的构建以大鼠结缔组织生长因子（CTGF）和金属蛋白酶组织抑制因子1（TIMP-1）基因为靶点的短发夹RNA（shRNA）表达质粒。方法根据前期筛选出的对CTGF和TIMP-1基因最有效的RNA干扰靶位,各设计一对有短发夹结构的RNA干扰（RNAi）靶点序列,退火形成双链DNA,克隆到质粒载体psiRNA-h7SKGFPzeo;构建重组质粒载体psiRNA-GFP-CTGF和psiRNA-GFP-TIMP-1,并进行酶切与测序鉴定。结果酶切与序列测定均提示重组质粒psiRNA-GFP-CTGF和psiRNA-GFP-TIMP-1构建成功。结论成功构建靶向大鼠CTGF和TIMP-1最有效的RNAi靶位的shRNA表达质粒,为进一步探索肝纤维化基因治疗的新途径打下了实验基础。

关键词：金属蛋白酶类 rna干扰 质粒 肝纤维化 生长因子 

单位：泸州医学院附属医院感染病科 四川泸州646000 河北省秦皇岛市第三人民医院肝病科 066000 山东省荷泽市市立医院传染科 274031 湖北省荆州市中心医院感染科 434000 四川省广元市第一人民医院 628017