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脐静脉内皮细胞诱导脐血单个核细胞向树突状细胞的分化

齐莹莹 杜英 李倩如 陈惠萍 徐虹 周云 董子明 重庆医学 2012年第04期

摘要:目的探讨人脐静脉内皮细胞对人脐血单个核细胞(UBMCs)向树突状细胞(DC)分化的影响,建立更便捷、更经济体外培养DC的方法。方法胶原酶消化分离出脐静脉内皮细胞(HUVEC),经鉴定和体外培养扩增后,使其平铺生长于Tran-swell板上室底部,将UBMCs接种到Transwell小室内,同时加入EC9706细胞冻融形成的蛋白质抗原,与HUVEC共培养,使UBMCs与HUVEC紧密接触并从Transwell板上室迁移到下室,收集Transwell板下室细胞,流式细胞术检测下室细胞DC相关表面标志CD80、CD40、CD83、CD1a和MHC分子;通过MTT法检测肿瘤负载的UBDC诱导CTL对靶细胞的特异性杀伤作用。结果经HUVEC诱导并负载了肿瘤细胞抗原的DC CD80、CD40、CD83、CD1a和MHC-Ⅱ类分子表达增加,产生的细胞毒性T细胞(CTL)可特异性杀伤食管癌细胞EC9706;与细胞因子诱导DC活化的CTL对EC9706的杀伤率比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论利用Transwell小室以人原代脐静脉内皮细胞诱导脐血单个核细胞分化的DC是可行的一种实验方法。

关键词:树突状细胞脐静脉内皮细胞脐血单个核细胞

单位:郑州市人民医院检验科 450000 郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室 450001 郑州大学基础医学院病理生理学教研室 450001 河南省肿瘤研究所 郑州450000 河南省人民医院肿瘤科 郑州450000

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